植物維生素D2  elisa檢測   elisa原理

產(chǎn)品名稱：植物維生素D2 ELISA試劑盒

英文名稱：Plant Vitamin D2,VD2 ELISA KIT

Elisa實驗前的準備
　　1仔細閱讀說明書
　　2確定試劑盒在有效期內(nèi)
　　3按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）
　　4標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存
　　5準備好所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機等
　　6根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量
　　7按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑
　　DIY夾心法ELISA常見技術(shù)指南
　　8選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對。
　　9ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應(yīng)包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
　　10標準品的配制：對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書，注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié)，將凍干的細胞因子復(fù)溶。
　　11一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
　　12為了優(yōu)化靈敏度，建議過夜孵育標準品和標本。
　　13若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
　　14當測定混合液體中的抗原時，如血清，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig.

ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標本,因此，也適合于血清流行病學調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。
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