豬瘟抗體實驗結(jié)果判定方法

中國農(nóng)業(yè)大學(xué)的陳老師于五月在我公司代測豬瘟抗體、狂犬病病毒、藍(lán)耳病、白介素、干擾素等相關(guān)系列17個指標(biāo)的ELISA實驗：現(xiàn)需發(fā)表文獻(xiàn)特我公司關(guān)于豬瘟抗體等實驗的詳細(xì)操作流程以及結(jié)果判定方法。我司技術(shù)做出如下詳細(xì)解答：

實驗操作方法：

1．用包被液將豬瘟弱毒單抗純化酶聯(lián)抗原、豬瘟強(qiáng)毒單抗純化酶聯(lián)抗原各做100倍稀釋，每孔包被100µl，4℃放置一晚上。
2．次日取出，甩去孔內(nèi)液體，3×3′沖洗。
3．將待檢血清以PBS液做400倍稀釋，每孔加100µl同時將豬瘟陽性血清、豬瘟陰性血清各做100倍稀釋，于對照孔中加100μl。37℃溫育1.5h～2h。
4．重復(fù)第二步，取出，甩去孔內(nèi)液體，3×3′洗滌。
5．將兔抗豬IgG酶標(biāo)抗體以PBS液做100倍稀釋，每孔加100μl，37℃溫育1.5h～2h。
6．重復(fù)第4步。
7．每孔加底物溶液100µl，室溫下觀察顯色反應(yīng)。當(dāng)陰性對照孔稍顯色時，立即終止反應(yīng)，并以陰性孔做空白對照。
8．每孔加終止液50µl立即于酶聯(lián)免疫吸附檢測儀測定490nm波長的光密度。


結(jié)果判定
1.在豬瘟弱毒酶聯(lián)板上，OD≥0.2，為豬瘟弱毒抗體陽性；OD＜0.2，為豬瘟弱毒抗體陰性。
2.在豬瘟強(qiáng)毒酶聯(lián)板上，OD≥0.5，為豬瘟強(qiáng)毒抗體陽性；OD＜0.2，為豬瘟強(qiáng)毒抗體陰性